中国是全球结直肠癌每年新发病例最多的国家，我国结直肠癌的发病率和死亡率逐年上升，已成为严重威胁人群健康的重要公共卫生问题。结直肠癌恶性程度高，现有疗法疗效并不理想，即使是针对早期患者的手术切除，复发率也高达40 %，针对晚期患者的放/化疗又容易产生耐药性。据统计，结直肠癌早期患者的五年生存率约90 %，但晚期患者的五年生存率不足15 %，因此，寻找结直肠癌的新型治疗方法具有重要的科学意义。近年来，免疫疗法在肿瘤治疗学领域的发展突飞猛进，已成为多种恶性肿瘤的潜在治疗方法，这为结直肠癌的治疗打开了新思路。其中，嵌合修饰的T细胞（Chimeric Antigen Receptor Engineered T cells，CAR-T）疗法在血液肿瘤治疗中表现惊艳，成为领域内唯一被FDA批准上市的细胞产品。随后，越来越多的CAR-T疗法向实体瘤发起冲击，希望在实体瘤的治疗上做出突出贡献。靶向HER2的CAR-T疗法已被用于治疗乳腺癌、卵巢癌、胃癌、肺癌等，并取得显著疗效，近期研究发现HER2在结直肠癌中的表达水平同样显著升高，是结直肠癌的潜在治疗靶点，但HER2 CAR-T靶向治疗结直肠癌的特异性与有效性尚缺乏系统的研究。
2021年11月27日，澳洲5·（中国）集团有限公司,公共卫生学院徐婕讲师与首都医科大学陈瑞教授课题组合作，在Cell Death Disease上发表题为HER2-specific chimeric antigen receptor-T cells for targeted therapy of metastatic colorectal cancer的最新研究成果。首先，为了证实HER2是结直肠癌、尤其是转移性结直肠癌的潜在治疗靶点，该研究利用HER2特异性抗体、通过流式细胞术在7种常用结直肠癌细胞株、86对结直肠癌患者新鲜组织样本中检测HER2的表达水平，并利用免疫组织化学染色技术在扩大样本的1040例结直肠癌患者组织芯片中验证HER2的表达水平，结果显示：HER2在转移性结直肠癌患者组织中的表达水平显著升高，HER2的表达水平与患者预后相关，证实HER2是转移性结直肠癌的潜在治疗靶点。
通过与爱康得生物科技(苏州)有限公司合作，利用第二代CAR技术自主构建人源性、特异性HER2-CAR，通过病毒感染技术感染对数生长期的T细胞，以构建特异性的HER2 CAR-T细胞。将HER2 CAR-T细胞与结直肠癌细胞进行不同比例的共培养（E：T = 1：1，5：5，10：1），利用乳酸脱氢酶（Lactate dehydrogenase，LDH）检测试剂盒、在酶标仪上检测HER2 CAR-T细胞对癌细胞的特异性裂解作用；利用酶联免疫吸附测定共培养前后细胞因子IL-2的分泌；利用Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒、通过流式细胞仪检测HER2 CAR-T对癌细胞凋亡的影响，并对数据结果进行统计学分析；此外，对对照组T细胞和HER2 CAR-T细胞在病毒感染7天后进行凋亡水平和耗竭因子表达水平检测，在病毒感染14天后进行染色体核型分析，评估HER2 CAR-T细胞治疗结直肠癌的安全性。结果显示：HER2 CAR-T在体外表现出特异性的杀伤作用及良好的安全性。
在此基础上，建立三种不同类型的结直肠癌异种移植动物模型，深入探索HER2 CAR-T对结直肠癌发生发展的影响。结果显示：无论是通过腋下注射的方式构建结直肠癌异种移植小鼠模型、利用新近确诊的结直肠癌患者新鲜肿瘤组织样本构建PDX小鼠模型，还是利用尾静脉注射构建的结直肠癌转移模型，HER2 CAR-T细胞均表现出显著的抗肿瘤疗效及安全性。
综上所述，该研究鉴于以往的经验和未来的可能性，大胆探索将CAR-T疗法引入实体瘤治疗。该研究是第一个通过一系列严格的体内/外实验证实HER2 CAR-T是转移性结直肠癌的一种新兴的免疫治疗方法，为此类患者的康复提供了一种新的治疗策略。
澳洲5·（中国）集团有限公司,公共卫生学院徐婕讲师为论文第一作者，首都医科大学陈瑞教授为本文的通讯作者。
图1HER2 CAR-T细胞疗法用于治疗结直肠癌的三种动物模型
论文链接：https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34839348/
